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前言

目前，免疫治療已經(jīng)成為除手術(shù)、化療和放療之外的抗腫瘤治療的第四大支柱，其中基于T細胞的免疫治療是一種有效的癌癥治療策略。根據(jù)αβ和γδT細胞受體（TCR）的表達，T細胞可分為兩個主要亞群。αβT細胞識別非自身的肽抗原，如癌細胞表達的抗原。αβT細胞是適應(yīng)性免疫的效應(yīng)細胞，這些細胞以主要組織相容性復(fù)合體（MHC）限制的方式發(fā)揮細胞毒性。然而，由于MHC分子的丟失，腫瘤細胞通常抵抗αβT細胞的攻擊。

相比之下，γδT細胞是固有免疫系統(tǒng)中的效應(yīng)細胞，這些細胞以MHC不受限制的方式發(fā)揮作用，使它們成為癌癥免疫治療的理想介質(zhì)。最近的研究表明，γδT細胞對各種類型的癌細胞具有強大的細胞毒性作用。然而，γδT細胞僅占循環(huán)淋巴細胞的一小部分，臨床效益并不令人滿意。目前，一些改進方法，如雙特異性抗體和CAR－T可能突破γδT細胞的局限性，提高抗腫瘤效果。

γδT細胞的激活

人類外周血γδT細胞主要表達Vδ2鏈和Vγ9鏈，在識別磷酸化抗原（PAG）時被激活，如（E）－4－羥基－3－甲基－2－烯基焦磷酸鹽（HMBPP）。BTN3A1是BTN3A（CD277）家族的亞型，在PAG激活γδT細胞中起著不可或缺的作用。BTN3A1在細胞表面廣泛表達，由兩個免疫球蛋白樣胞外結(jié)構(gòu)域和一個胞內(nèi)B30．2結(jié)構(gòu)域組成。

一般來說，在生理條件下，PAG的濃度不足以刺激γδT細胞。然而，由于代謝重編程，腫瘤細胞表現(xiàn)出PAG生成上調(diào)，這增加了甲羥戊酸途徑的活性。此外，PAG濃度可在藥理學(xué)上增加。用于治療高鈣血癥或癌癥骨轉(zhuǎn)移的含氮雙膦酸鹽，如帕米膦酸鹽（Pam）和唑來膦酸鹽（ZOL），可抑制法尼基二磷酸（FPP）合成酶，這是甲羥戊酸途徑中的限速酶。因此，IPP（FPP上游代謝物）濃度增加，從而激活γδT細胞。

γδT細胞與癌細胞的其它相互作用

γδT細胞不僅通過γδTCR識別PAG，還通過NKG2D受體識別應(yīng)激相關(guān)抗原，對于自然殺傷細胞，這種識別方法是不受MHC限制的。MICA是一種刺激NKG2D受體的功能性配體，除MICA外，人類NKG2D配體中的MICB和ULBP1－4與NKG2D受體之間的相互作用對癌細胞識別和γδT細胞介導(dǎo)的細胞毒性非常重要。

在活化的γδT細胞中，F(xiàn)as配體（FasL）和TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）的表達上調(diào)。FasL與CD95（也稱為Fas或APO－1）相互作用， FasL結(jié)合CD95后激活caspase級聯(lián)反應(yīng)，從而啟動癌細胞凋亡。

TRAIL與五種受體（TRAILRs）相互作用：DR4、DR5、DcR1、DcR2和骨保護素。死亡受體DR4和DR5含有一個稱為死亡域的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，當這些受體與TRAIL結(jié)合時，該區(qū)域使這些受體能夠啟動細胞毒性信號。因此，腫瘤細胞中CD95或死亡受體DR4或DR5的上調(diào)可能增強γδT細胞介導(dǎo)的細胞毒性。

腫瘤微環(huán)境與γδT細胞

一些研究證明了γδT細胞的可塑性，經(jīng)PAGs激活后，γδT細胞通過分泌TNF－α和IFN－γ促進Th1免疫應(yīng)答。然而，γδT細胞也可以極化成與Th2細胞、Th17細胞或調(diào)節(jié)性T細胞（Treg）性質(zhì)相似的細胞。

腫瘤中不僅包括癌細胞，還包括細胞外基質(zhì)（ECM）、基質(zhì)細胞（如成纖維細胞和間充質(zhì)基質(zhì)細胞）、血管網(wǎng)絡(luò)和免疫細胞，如T細胞和B細胞、NK細胞以及各種免疫抑制細胞，如腫瘤相關(guān)巨噬細胞（TAM）、髓源性抑制細胞（MDSCs）等，構(gòu)成了腫瘤微環(huán)境（TME）。

TME中含有各種細胞因子、趨化因子、生長因子、炎癥介質(zhì)和基質(zhì)重塑酶，以促進組成TME的細胞之間的串擾；這種環(huán)境可以促進γδT細胞極化為Th17或Treg樣細胞，產(chǎn)生IL－17和TGF－β，有利于癌細胞增殖。產(chǎn)生IL－17的γδT細胞誘導(dǎo)血管生成并支持癌癥進展， TGF－β可負性調(diào)節(jié)γδT細胞。

靶向TME的治療，可以通過激活和改善γδT細胞的細胞毒性，增強抗腫瘤作用。在這些TME靶向治療中，針對抑制性免疫檢查點分子的治療性抗體是克服TME免疫抑制效應(yīng)的有效手段。過繼性γδT細胞與免疫檢查點抑制劑的結(jié)合是提高其細胞毒性的一種有希望的策略，因為PAG刺激的γδT細胞表達PD－1，阻斷PD－1可能增強γδT細胞的抗腫瘤作用。

γδT細胞治療的新形式

近年來，為了提高γδT細胞免疫治療的抗腫瘤效果，人們提出了幾種策略。雙特異性抗體的使用顯著提高了細胞毒性，臨床前研究發(fā)現(xiàn)，EpCAM／CD3雙特異性抗體增強了γδT細胞介導(dǎo)的肝母細胞瘤和兒童肝細胞癌的裂解。在臨床前模型中，用HER2／Vγ9雙特異性抗體體外擴增γδT細胞可顯著降低胰腺癌和結(jié)腸癌的生長。此外，還報告了一種tribody（HER22xCD16），其包含兩個HER2特異性單鏈片段，與一個靶向γδT細胞和NK細胞上表達的CD16單鏈片段融合，增強了γδT細胞和NK細胞介導(dǎo)的HER2表達腫瘤細胞的裂解。

嵌合抗原受體轉(zhuǎn)導(dǎo)的γδT細胞（CAR－γδT）是克服目前治療局限性的另一種新策略。臨床前研究發(fā)現(xiàn)，在體外與陰性的CAR－γδT細胞相比，帶有CD19特異性CAR－γδT細胞增強了對CD19＋腫瘤細胞的殺傷，在小鼠模型中減少了CD19＋白血病異種移植物。

CAR－T細胞免疫治療存在靶向效應(yīng)問題。Fisher等人設(shè)計了GD2特異性CAR－γδT細胞，以限制對正常細胞的毒性作用。GD2在神經(jīng)母細胞瘤細胞表面和其他幾種癌細胞上過度表達。在該研究中，γδT細胞識別腫瘤PAG抗原，然后抗GD2－CAR識別GD2并激活下游信號域以發(fā)揮抗腫瘤作用。因此，與γδTCR結(jié)合的表達GD2的神經(jīng)母細胞瘤細胞被有效裂解，而與γδTCR結(jié)合的表達GD2的細胞沒有受到影響。

目前，一些臨床研究正在進行中。CAR－γδT細胞有望成為一種新型的γδT細胞免疫療法。

小結(jié)

基于γδT細胞的免疫治療非常有吸引力，這些細胞在體外和小鼠模型中對各種類型的癌癥都顯示出強烈的細胞毒性作用。然而，臨床試驗顯示臨床效益有限。新的方法，包括γδT細胞和免疫檢查點抑制劑聯(lián)合免疫治療，雙特異性抗體和CAR－γδT細胞都是有望克服目前治療局限性的新策略。TME對γδT細胞免疫抑制作用的進一步研究，以及抗癌藥物聯(lián)合治療、分子靶向藥物、表觀遺傳藥物、雙特異性抗體以及CAR－γδT細胞的臨床研究，將為未來γδT細胞免疫治療的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

參考文獻：

1．Strategies to Improve the Antitumor Effectof γδT Cell Immunotherapy for Clinical Application． Int J Mol Sci． 2021Aug； 22（16）： 8910．

       原文標題 : 腫瘤免疫治療中的γδT細胞