為評價疫苗的免疫原性，研究者在第0天和第7天分別給小鼠接種不同劑量的候選疫苗后，未觀察到炎癥或其他不良反應，新冠病毒的S蛋白和RBD特異性的免疫球蛋白在免疫后小鼠的血清中迅速產(chǎn)生，并于第6周達到滴度峰值。RBD特異的免疫球蛋白在S蛋白誘導產(chǎn)生的抗體中占一半，提示RBD是主要的免疫原，這也與恢復期患者的血清學特征非常相似。與恢復期患者血清相比，該疫苗誘導出了更高滴度的S蛋白特異性抗體。

接下來，研究者使用微量中和試驗測定新冠病毒特異性中和抗體在一段時間內(nèi)的水平。結(jié)果顯示，高劑量免疫的中和抗體在初免后第1周出現(xiàn)，在第2周加強免疫后顯著增加，在第7周達到峰值，而對照組則未檢測到新冠病毒特異性抗體反應。研究者在大鼠中以及對不同毒株的實驗中也得到了相似的結(jié)果。

隨后研究者在疫苗免疫后的恒河猴中進行了攻毒實驗以評價疫苗免疫原性和保護效果。研究者在第0、7和14天給恒河猴接種不同劑量（3微克和6微克）的疫苗，結(jié)果顯示，S蛋白特異性的免疫球蛋白和中和抗體均在第2周被誘導出來，并在第3周繼續(xù)增加，抗體滴度與恢復期的新冠患者的血清中的抗體滴度相似。

之后，研究者在第22天進行攻毒。結(jié)果顯示，與對照組相比，疫苗免疫后的恒河猴肺部組織病理變化顯著減小，病毒載量也顯著下降。高劑量組的4只恒河猴感染后的第7天，咽喉、肛門和肺部都未檢測到病毒，也沒有觀察到抗體依賴的增強現(xiàn)象。中劑量組感染后第7天咽部、肛門和肺部標本中能部分檢測到病毒，但與對照組相比病毒載量降低了約95％。結(jié)果表明，接種6微克劑量候選疫苗后可以對新冠病毒攻毒提供完全的保護，3微克劑量的疫苗有部分保護作用。

研究者又通過觀測臨床指標和生化指數(shù)來驗證該疫苗的安全性。他們發(fā)現(xiàn)，所有接種疫苗的恒河猴均未發(fā)現(xiàn)發(fā)燒和體重減輕現(xiàn)象，且食欲和精神狀態(tài)都保持正常。在血液和生化分析方面，接種了疫苗的恒河猴的淋巴細胞亞群比例（CD3＋、CD4＋和CD8＋）以及關(guān)鍵細胞因子（TNF－＆alpha；、IFN－＆gamma；、IL－2、IL－4、IL－5和IL－6）與對照組相比均沒有顯著變化。此外，第29天對接種疫苗恒河猴的肺、心、脾、肝、腎和腦在內(nèi)的各種器官組織的病理學評估表明，該疫苗也沒有引起顯著的病理學特征，以上結(jié)果表明候選疫苗在恒河猴中具有安全性。

值得一提的是，因為恒河猴非常接近人類，且該研究采用了多種毒株，研究本身具有廣泛的參考意義。

該研究由中國醫(yī)學科學院醫(yī)學實驗動物研究所秦川團隊領(lǐng)銜，聯(lián)合浙江省疾控中心張嚴峻團隊、科興控股生物技術(shù)有限公司、中國科學院生物物理研究所王祥喜團隊、中國食品藥品檢定研究院、中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所等多家單位合作完成。

進入臨床試驗的新冠疫苗

目前，全球新冠疫苗的研發(fā)推進速度都很快。

如上文提到，現(xiàn)如今已經(jīng)有180多種疫苗進入了臨床試驗。其中據(jù)張文宏介紹，美國有2個疫苗進入三期臨床試驗，我國有2個疫苗進入二期臨床試驗。

基于上述研究成果正在進行臨床試驗的疫苗“克爾來福”是我國研制的一種滅活疫苗，它用新型冠狀病毒（CZ株）接種Vero細胞，經(jīng)病毒培養(yǎng)、收獲、滅活、純化和鋁吸附制成，其主要成分為滅活的新型冠狀病毒（SARS－CoV－2），不添加防腐劑和生物保護劑。

圖 ｜ 新冠病毒滅活疫苗的特征描述

1月28日科興中維正式啟動了該疫苗研制項目；3月13日，科興中維先后向國家藥監(jiān)局藥品審評中心（CDE）滾動提交了18輪申報資料，并于4月12日向CDE正式提出臨床試驗申請；4月16日，它的臨床一期試驗正式在江蘇省徐州市睢寧縣啟動，共招募144名18至59歲的健康志愿者，分為隨機、雙盲、安慰劑對照（不含病毒成分的對照疫苗）組三個組別。

當然，不僅如此，我國還有其他兩種滅活病毒也同樣進入了臨床試驗，國外進入臨床試驗的疫苗還包括英國牛津大學研發(fā)的腺病毒載體疫苗、美國生物科技公司Moderna研發(fā)的mRNA疫苗mRNA－1273、德國生物科技公司BioNTech研發(fā)的mRNA疫苗BNT162以及美國Inovio Pharmaceuticals研發(fā)的新冠DNA疫苗INO－4800等。